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CytoSMART Lux3細胞成像儀
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Axion CytoSMART Lux3箱(xiang)內全自動(dong)活(huo)細胞(bao)成(cheng)像系統(原(yuan)Lonza CytoSMART活(huo)細胞(bao)成(cheng)像儀(yi)),為荷蘭進口細胞(bao)成(cheng)像儀(yi),體(ti)積小巧,可(ke)方便地用于二氧化(hua)碳培養箱(xiang)內,在(zai)明(ming)場、熒光通道下對細胞(bao)培養進行監測,并通過拍攝(she)高品質細胞(bao)圖像、延時攝(she)影、快速可(ke)靠(kao)的數據處理(li)軟件(jian),實現對樣(yang)本形態(tai)及行為變(bian)化(hua)的實時可(ke)視化(hua)分析。

Axion CytoSMART Lux3箱內全自動細胞成像系統 北京澤平

 

CytoSMART Lux3細胞成像儀優勢

1、體積小巧

所有硬件(jian)和電(dian)子器件(jian)都能在5~40°C及(ji)20~95%的濕度環境下運(yun)行。更小尺寸,重量(liang)1.3kg,箱(xiang)內移動無壓力,空(kong)間占用少。

2、操作簡單

step-by-step引導式實驗流(liu)程設定,點擊即(ji)自(zi)動呈現(xian)數據、圖片或影(ying)像,照片上傳(chuan)國內云端(duan)服(fu)務器,進行圖像數據分析(xi)。即(ji)插即(ji)用,無(wu)需(xu)安裝調試,無(wu)易損模塊(kuai),無(wu)需(xu)維護(hu)。

3、高品質圖片

LED光源(yuan)位于樣(yang)本上方,數據采集(ji)由樣(yang)本臺下方的(de)可變焦鏡頭完成(cheng)(cheng),640萬像(xiang)(xiang)(xiang)素CMOS成(cheng)(cheng)像(xiang)(xiang)(xiang),10倍鏡下0.7μm/像(xiang)(xiang)(xiang)素的(de)超高分辨(bian)率,只使用CMOS 67%的(de)核心區域成(cheng)(cheng)像(xiang)(xiang)(xiang),避免畸變困擾。

4、方便(bian)拓展

可多臺(tai)并聯,提(ti)升實驗通(tong)量(liang)和平臺(tai)共享能(neng)力。一拖(tuo)四(si),單臺(tai)終(zhong)端即能(neng)實現實驗室集約管理。

5、兼容各類(lei)細胞培養容器

可(ke)使用(yong)任何高度(du)小于55mm(樣本臺(tai)到(dao)光源下沿的距離)的透(tou)明培(pei)(pei)養容(rong)器,如6~384孔多孔培(pei)(pei)養板(ban)、培(pei)(pei)養皿、T25~T225培(pei)(pei)養瓶等。

 

 

CytoSMART Lux3細胞(bao)成像(xiang)儀應用

支持明場、以(yi)及紅色(se)和綠色(se)熒光(guang)雙通道細胞計數(shu),可(ke)對樣本中(zhong)被熒光(guang)標(biao)記(ji)細胞的數(shu)量和大小進行定量計算,并開展長期追(zhui)蹤。

1、轉染與轉導

CytoSMART Lux3優秀的成像能(neng)力(li)和機器學習算法(fa),可對熒光(guang)報告(gao)基因載(zai)體的表達進行直(zhi)接(jie)觀測和定(ding)量測定(ding)。
 
Axion CytoSMART Lux3箱內全自動細胞成像系統,明場、熒光細胞成像儀 北京澤平

實驗樣本(ben)為HepG2細(xi)胞,使用了(le)BacMam表達(da)系統進行(xing)轉(zhuan)導(dao)。通過圖像數據自(zi)動分(fen)析,軟(ruan)件(jian)給(gei)出了(le)細(xi)胞覆(fu)蓋度和(he)熒光標記計(ji)數的(de)實時(shi)結(jie)果。藍色(se)(se)對應(ying)整體樣本(ben),綠(lv)色(se)(se)和(he)紅(hong)色(se)(se)對應(ying)其中表達(da)了(le)BacMam-Actin-GFP及/或BacMam-Nucleus-RFP的(de)那部分(fen)細(xi)胞。可以看到從轉(zhuan)染后第(di)7小時(shi)開(kai)始,紅(hong)色(se)(se)和(he)綠(lv)色(se)(se)熒光蛋白的(de)表達(da)一直呈現(xian)迅(xun)速升高的(de)趨勢,且(qie)過夜以后仍然(ran)未見(jian)衰(shuai)退(tui),雖然(ran)此時(shi)細(xi)胞的(de)增殖已經(jing)進入平臺期。而且(qie)轉(zhuan)導(dao)表達(da)會先發生(sheng)在(zai)細(xi)胞骨(gu)架中,那里表達(da)的(de)蛋白量也(ye)高于細(xi)胞核(he)。這些數據結(jie)合影像,提供了(le)綜(zong)合性的(de)轉(zhuan)導(dao)質控(kong)依據。
 
Axion CytoSMART Lux3箱內全自動細胞成像系統,明場、熒光細胞成像儀 北京澤平
Axion CytoSMART Lux3箱內全自動細胞成像系統,明場、熒光細胞成像儀 北京澤平

 

2、細胞匯合變化 

支持在(zai)2D培(pei)(pei)養體系中計算(suan)被細(xi)胞(bao)(bao)覆(fu)(fu)蓋的表(biao)面占比,提(ti)供高效(xiao)、保真(zhen)的細(xi)胞(bao)(bao)匯(hui)合(he)度(du)分析。基于(yu)圖像(xiang)的自(zi)動捕獲及(ji)計算(suan),自(zi)動生成(cheng)報告(gao)展示細(xi)胞(bao)(bao)覆(fu)(fu)蓋度(du)(%,成(cheng)像(xiang)范圍內(nei)總的細(xi)胞(bao)(bao)覆(fu)(fu)蓋度(du),當使用熒(ying)光成(cheng)像(xiang)時,分別給出(chu)(chu)紅色(se)及(ji)綠色(se)熒(ying)光的覆(fu)(fu)蓋度(du))、匯(hui)合(he)比例(%,發出(chu)(chu)綠色(se)及(ji)紅色(se)熒(ying)光物(wu)體各自(zi)的覆(fu)(fu)蓋度(du))數據。應(ying)用于(yu)在(zai)無標記或熒(ying)光標記實(shi)驗中計算(suan)細(xi)胞(bao)(bao)匯(hui)合(he)度(du)、確定合(he)適的細(xi)胞(bao)(bao)傳代時間點(dian)以維持細(xi)胞(bao)(bao)表(biao)型及(ji)培(pei)(pei)養質(zhi)量、藥物(wu)處理(li)后(hou)細(xi)胞(bao)(bao)匯(hui)合(he)度(du)及(ji)活(huo)力(li)評估、設定提(ti)醒內(nei)容告(gao)知何時完成(cheng)細(xi)胞(bao)(bao)傳代等。CytoSMART Lux3自(zi)動對細(xi)胞(bao)(bao)活(huo)力(li)和增殖過程(cheng)進行(xing)追蹤并給出(chu)(chu)定量分析,提(ti)高實(shi)驗的效(xiao)率和可重復性。
 
Axion CytoSMART Lux3箱內全自動細胞成像系統,明場、熒光細胞成像儀 北京澤平

 

3、劃痕/遷移跟蹤

支持觀察(cha)劃(hua)(hua)痕(hen)(hen)實(shi)驗,可在實(shi)驗全程(cheng)中(zhong)無(wu)(wu)標(biao)記地檢(jian)(jian)測細(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)遷移,實(shi)時觀察(cha)并定量(liang)檢(jian)(jian)測傷口閉(bi)合(he)或者是細(xi)(xi)胞(bao)侵襲(xi)的(de)(de)過(guo)程(cheng),以評估藥(yao)物處(chu)理及條件改變對于遷移過(guo)程(cheng)中(zhong)細(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)影響等(deng)。系統(tong)可自動選定無(wu)(wu)細(xi)(xi)胞(bao)區域(即劃(hua)(hua)痕(hen)(hen)),并定量(liang)計(ji)算該缺口閉(bi)合(he)及細(xi)(xi)胞(bao)遷移的(de)(de)速度,提供(gong)劃(hua)(hua)痕(hen)(hen)面積(μm2,變化(hua)中(zhong)的(de)(de)劃(hua)(hua)痕(hen)(hen)面積)、速度(μm2/s,細(xi)(xi)胞(bao)遷移速度)等(deng)數據(ju)。
 
Axion CytoSMART Lux3箱內全自動細胞成像系統,明場、熒光細胞成像儀 北京澤平

 

4、細胞凋亡

結(jie)合特定(ding)凋亡(wang)通路(lu)的熒光標(biao)記,Lux3可(ke)以在監控樣本動態變化的過(guo)程中(zhong),提示凋亡(wang)事件(jian)發生的時間順序或通路(lu)依賴性。
 
Axion CytoSMART Lux3箱內全自動細胞成像系統,明場、熒光細胞成像儀 北京澤平

綠色(se)熒光染(ran)(ran)料pSIVA-IANBD能結合外翻的(de)(de)(de)細(xi)胞(bao)膜(mo)中(zhong)磷脂酰絲氨酸(PS),從而(er)提示(shi)早期的(de)(de)(de)凋亡發生;而(er)PI則是常(chang)用的(de)(de)(de)細(xi)胞(bao)核紅色(se)熒光染(ran)(ran)料,它能指示(shi)凋亡過(guo)程的(de)(de)(de)終(zhong)結。在兩組CHOK-1細(xi)胞(bao)樣(yang)本中(zhong)加入上述兩種熒光染(ran)(ran)料后,并聯(lian)使用兩臺Lux3,進(jin)行了間隔為10分鐘的(de)(de)(de)連(lian)續攝(she)像并一直持續到第24小時。圖中(zhong)的(de)(de)(de)上層(ceng)為空白對照組的(de)(de)(de)延時成像結果,下層(ceng)為同時間點經0.6mM H2O2處理(li)發生了細(xi)胞(bao)凋亡的(de)(de)(de)實驗組的(de)(de)(de)成像結果。通過(guo)對熒光區(qu)域的(de)(de)(de)定量識(shi)別(bie),CytoSMART云端計算能分析(xi)得到并自(zi)動(dong)生成兩個(ge)樣(yang)本各自(zi)的(de)(de)(de)凋亡指數曲(qu)線(xian),為凋亡研究提供重要的(de)(de)(de)判斷(duan)依(yi)據(ju)。
 


5、單細胞示蹤

在(zai)ibidi μ-Slide channel板(ban)(ban)中(zhong)觀察細胞對FBS的(de)(de)(de)(de)濃(nong)度(du)(du)變化是(shi)否做出趨向(xiang)性運動。HeLa細胞上樣(yang)時(shi)培(pei)養基中(zhong)FBS的(de)(de)(de)(de)濃(nong)度(du)(du)為(wei)(wei)10%。在(zai)相鄰的(de)(de)(de)(de)兩個(ge)Channel中(zhong)則分別添加20%和(he)0% FBS濃(nong)度(du)(du)的(de)(de)(de)(de)同種培(pei)養基,在(zai)這樣(yang)的(de)(de)(de)(de)FBS濃(nong)度(du)(du)梯度(du)(du)環(huan)境(jing)中(zhong),細胞是(shi)可以(yi)移動的(de)(de)(de)(de)。另設一塊趨化板(ban)(ban)作為(wei)(wei)對照組,其中(zhong)不同部位的(de)(de)(de)(de)FBS濃(nong)度(du)(du)均為(wei)(wei)10%。該實驗并聯使用(yong)了兩臺Lux 3,以(yi)每(mei)5分鐘拍(pai)攝一次的(de)(de)(de)(de)頻率連續采(cai)樣(yang)24小時(shi)。隨后以(yi)圖片為(wei)(wei)原始(shi)數據,使用(yong)CytoSMART單細胞識(shi)別功能及第三方(fang)軟(ruan)件(jian)的(de)(de)(de)(de)追蹤功能,來(lai)對每(mei)個(ge)細胞的(de)(de)(de)(de)運動軌跡進行統(tong)計學(xue)分析。結(jie)果發現,HeLa細胞在(zai)FBS濃(nong)度(du)(du)恒定的(de)(de)(de)(de)環(huan)境(jing)中(zhong)會在(zai)更大范(fan)(fan)圍內做均勻分散;而(er)在(zai)具(ju)有FBS濃(nong)度(du)(du)差的(de)(de)(de)(de)環(huan)境(jing)中(zhong),其運動范(fan)(fan)圍則更為(wei)(wei)集中(zhong),而(er)且(qie)存在(zai)向(xiang)更高濃(nong)度(du)(du)區域(yu)運動的(de)(de)(de)(de)傾向(xiang)。
 
Axion CytoSMART Lux3箱內全自動細胞成像系統,明場、熒光細胞成像儀 北京澤平

技術參數:
型號 Lux3 BR Lux3 FL
名稱 箱內明場活細胞成像儀 箱內(nei)熒(ying)光(guang)/明場活細胞成(cheng)像儀(yi)
放大倍數(shu) 10×物鏡,20×數放大
感光(guang)元件 6.4 MP CMOS
照(zhao)片大(da)小 2072像素*2072像素
明場掃描范圍(wei) 1.45mm*1.45mm
光學通(tong)道 明場 明場,紅(hong)色/綠色熒光(guang)
數據格式(shi) JPG、TIFF、XLSX、MP4
培養容器尺(chi)寸(cun) 任何高度小于55mm的透明底培養容器
主(zhu)機(ji)尺寸 166mm*140mm*135mm (L*W*H)
重量 1.3kg
運行環境 5~40℃,20-95%濕(shi)度


 

 

參考文獻

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8. Highly Pluripotent Adipose-Derived Stem Cell–Enriched Nanofat: A Novel Translational System in Stem Cell Therapy. Lindsey Alejandra Quintero Sierra, Reetuparna Biswas, Francesco De Francesco, et al. Cell Transplantation, May 27, 2023, //doi.org/10.1177/09636897231175968
9. Toxicity evaluation of Pinus radiata D.Don bark wax for potential cosmetic application. Daniel Sandoval-Rivas, Daniela V. Morales, Matías I. Hepp. Food and Chemical Toxicology, Volume 178, August 2023, 113896
10. Chitin-Glucan Complex Hydrogels: Physical-Chemical Characterization, Stability, In Vitro Drug Permeation, and Biological Assessment in Primary Cells. Diana Araújo, Thomas Rodrigues, Catarina Roma-Rodrigues, et al. Polymers, 2023, 15(4), 791, //doi.org/10.3390/polym15040791


 

 

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