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如(ru)細胞培養(yang)體(ti)(ti)系中存(cun)在(zai)支(zhi)原體(ti)(ti)污染，可(ke)能造(zao)成細胞生長緩慢、染色體(ti)(ti)異常、代謝異常、轉(zhuan)染效率低、病(bing)毒包裝效率低、細胞死亡等。造(zao)成實驗(yan)重復性低、結果不可(ke)信。由于支(zhi)原體(ti)(ti)大小(xiao)為0.1-0.3μm，無法通過過濾去除(chu)，無細胞壁結構，普通抗(kang)生素(su)如(ru)青霉素(su)等也無效，造(zao)成研究者細胞損(sun)失。

北(bei)京澤平代理(li)的(de)Lonza支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)系列產品，提供(gong)從支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)檢測、支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)清除、到支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)預防的(de)全套試劑和配套檢測儀器，輕松解決各類支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)污染(ran)問題。
 

一、Lonza支原體檢測試劑盒

Lonza MycoAlert支(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)檢(jian)測試劑盒(he)（MycoAlert PLUS Mycoplasma Detection Kit），可在20分鐘(zhong)內快速檢(jian)測細胞(bao)培養(yang)物是否存在支(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)污染。其利(li)用了180多種支(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)中廣泛(fan)存在的支(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)酶（在脲(niao)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)屬、細菌(jun)、酵母中少見），當活(huo)支(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)被MycoAlert試劑裂(lie)解后，支(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)酶釋放到(dao)培養(yang)液中，并與(yu)MycoAlert底(di)物特異(yi)性反應，催化ADP轉(zhuan)化為ATP，ATP與(yu)熒(ying)光素(su)酶發生反應產生光信號，通過檢(jian)測底(di)物加入前后讀數的比(bi)值，可判斷樣(yang)本中是否含(han)有支(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)。



①酶學檢測，操作簡單，20分鐘出結果，輕松量化陰性、陽性；
②覆蓋范圍廣，可檢測44種支原體，包含細胞培養中最常見的6種支原體（口腔支原體、精氨酸支原體、豬鼻支原體、萊氏無膽甾原體、發酵支原體、唾液支原體，占支原體污染的95%）




支原體檢測流程

1、取2mL培養基上清（建議培養48小時以上），200g離心5分鐘，去除細胞和細胞碎片；
2、取100μL上清，加入100μL裂解試劑（MycoAlert PLUS Reagent，含裂解試劑、熒光素酶、熒光素），裂解支原體；
3、室溫22℃（不超過25℃）孵育5分鐘，檢測背景ATP，測量發光值得到讀數A；
4、加入100μL支原體酶特異性底物（MycoAlert PLUS Substrate）；
5、室溫孵育10分鐘，測量發光值得到讀數B，計算B/A比值。
 

結果解讀

二、支原體檢測儀器

1、Lonza專用單孔生物發光檢測儀器Lucetta 2

①小型便攜式管式光度計，一鍵式檢測，不需要復雜的軟件設置；
②應用廣泛，兩種基本檢測模式，高靈敏度和線性度，最多可儲存2000個單一樣本讀數；
③無特殊耗材，只需要無菌1.5mL離心管即可檢測。

 

2、多孔單功能發光檢測儀或多功能酶標儀

如使用多功(gong)能酶(mei)標儀(yi)檢測(ce)，要(yao)選擇Luminescence檢測(ce)功(gong)能，不(bu)需要(yao)設(she)置濾光片(pian)；如果使用多孔板(ban)(ban)檢測(ce)，要(yao)用不(bu)透明的(de)白板(ban)(ban)或黑板(ban)(ban)。

 

三、Lonza支原體清(qing)除試劑盒

當(dang)發(fa)現(xian)存在支(zhi)原體污(wu)染(ran)，但樣品格外難(nan)得不可丟(diu)棄時，Lonza MycoZap支(zhi)原體去(qu)除試(shi)(shi)劑，可在4天內(nei)清除支(zhi)原體，拯救珍貴的細胞樣品。MycoZap支(zhi)原體去(qu)除試(shi)(shi)劑，結合(he)抗生(sheng)素(su)和抗代謝試(shi)(shi)劑，確保徹(che)底清除支(zhi)原體。在隨(sui)后(hou)的4-6周(zhou)內(nei)，可以使用Lonza MycoAlert支(zhi)原體檢測試(shi)(shi)劑盒進行不間斷檢測，以保證后(hou)續培(pei)養物(wu)不被污(wu)染(ran)。

①使用范圍廣，可徹底清除支原體、無膽甾原體、植物花螺原體等柔膜菌綱物種；
②使用簡單，只需將支原體清除試劑加入培養基中；
③細胞毒性小，不影響細胞正常培養。



 

四、Lonza支原體預防試劑盒

Lonza MycoZap支(zhi)原(yuan)體預(yu)防試劑（MycoZap Prophylactic），是一種特異(yi)性預(yu)防支(zhi)原(yuan)體污(wu)染的(de)抗生素(su)，其中MycoZap Plus可(ke)預(yu)防包括(kuo)支(zhi)原(yuan)體、革蘭(lan)氏(shi)陽(yang)性菌、革蘭(lan)氏(shi)陰性菌、真菌、酵母在內(nei)的(de)多種微(wei)生物污(wu)染，其配方根(gen)據細胞系、原(yuan)代細胞進行了特殊優化。

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