Lonza Nucleofector細(xi)(xi)胞核(he)(he)轉(zhuan)染儀(原Amaxa Nucleofector核(he)(he)轉(zhuan)儀),利用電(dian)脈沖在細(xi)(xi)胞膜(mo)上形成(cheng)小(xiao)孔(kong),使用根據(ju)細(xi)(xi)胞種(zhong)類進(jin)行優化的轉(zhuan)染液,通過系(xi)統內置的特(te)定種(zhong)類細(xi)(xi)胞轉(zhuan)染程(cheng)序,實現外源物質(DNA、RNA)進(jin)入(ru)細(xi)(xi)胞質、甚至直接穿(chuan)過核(he)(he)膜(mo)進(jin)入(ru)細(xi)(xi)胞核(he)(he)。
自2001年(nian)上市以來(lai),Lonza Nucleofector憑(ping)借高效的電穿孔轉(zhuan)(zhuan)染(ran)技術(shu),解決了(le)(le)哺乳動物真核細(xi)胞(bao)(bao)(bao)轉(zhuan)(zhuan)染(ran)效率低下的問題,實現了(le)(le)真核細(xi)胞(bao)(bao)(bao)高效轉(zhuan)(zhuan)染(ran)、細(xi)胞(bao)(bao)(bao)高活率、外(wai)源物質(zhi)直(zhi)接入核,可(ke)廣泛用于動物原代細(xi)胞(bao)(bao)(bao)、細(xi)胞(bao)(bao)(bao)系,進行懸浮(fu)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)、貼(tie)壁細(xi)胞(bao)(bao)(bao)原位轉(zhuan)(zhuan)染(ran)、多種(zhong)物質(zhi)共(gong)轉(zhuan)(zhuan)染(ran)等。其轉(zhuan)(zhuan)染(ran)效率最高可(ke)達(da)99%。
一、Lonza Nucleofector 2b細胞核轉(zhuan)染(ran)系統(tong)
即(ji)Lonza單孔細胞核(he)(he)轉(zhuan)染(ran)儀(yi),于2001年首次推(tui)出,是Lonza核(he)(he)轉(zhuan)儀(yi)基(ji)礎型號。2b核(he)(he)轉(zhuan)儀(yi)采用(yong)100μL體系電(dian)轉(zhuan)杯,鋁制電(dian)極,系統預制數百種細胞轉(zhuan)染(ran)程序,可低(di)通量進(jin)行質粒(li)、RNA等(deng)不同底物的(de)(de)轉(zhuan)染(ran),其應用(yong)歷史(shi)悠久,具(ju)有超(chao)過4000篇以上的(de)(de)引用(yong)文獻。
①提供50多種原代細胞、血液細胞、干細胞轉染試劑盒,適用于所有種類細胞系
②提供cGMP轉染試劑盒,適用于蛋白生產
③高性價比,滿足大多數實驗的基本功能需求
二、Lonza 4D-Nucleofector細胞核轉染系統
即(ji)Lonza 4D細(xi)胞(bao)核轉染(ran)儀(yi),是在2b核轉儀(yi)基(ji)礎上,進行大規模(mo)改(gai)良優化后(hou)的(de)(de)主力型號,功(gong)能更強大。其改(gai)良的(de)(de)聚合物電(dian)極,相較(jiao)傳(chuan)統(tong)鋁電(dian)極,細(xi)胞(bao)毒害小,轉染(ran)后(hou)細(xi)胞(bao)活(huo)率高,進一(yi)步提升了轉染(ran)效率。4D核轉儀(yi),采(cai)用(yong)模(mo)塊(kuai)化設(she)計(ji),不同功(gong)能模(mo)塊(kuai)可(ke)實現(xian)不同通量、細(xi)胞(bao)數量、貼壁形式的(de)(de)轉染(ran),使(shi)用(yong)時(shi)按需組裝(zhuang)。
①C模塊:Core模(mo)(mo)塊(kuai)(kuai),即(ji)核心模(mo)(mo)塊(kuai)(kuai),必(bi)選模(mo)(mo)塊(kuai)(kuai),作為(wei)程序(xu)運行模(mo)(mo)塊(kuai)(kuai),提供超過650種預置轉染程序(xu),適用于各類(lei)原代細(xi)胞、細(xi)胞系,是組裝(zhuang)4D核轉儀(yi)時(shi)的必(bi)選模(mo)(mo)塊(kuai)(kuai)。
②X模塊:可選(xuan)模塊(kuai),用于中(zhong)低通量(liang)轉(zhuan)(zhuan)染(ran)的(de)常規模塊(kuai),轉(zhuan)(zhuan)染(ran)細胞(bao)(bao)數量(liang)為2×10^4至2×10^7。提供(gong)2個電轉(zhuan)(zhuan)杯(各100μL體系)、一個16孔電轉(zhuan)(zhuan)板條(每孔20μL體系)的(de)轉(zhuan)(zhuan)染(ran)位置,可同(tong)時獨立轉(zhuan)(zhuan)染(ran)18種細胞(bao)(bao)。滿足懸(xuan)浮細胞(bao)(bao)、貼壁細胞(bao)(bao)(需要(yao)消化)的(de)基本(ben)轉(zhuan)(zhuan)染(ran)需求,也是(shi)目(mu)前最(zui)常選(xuan)用的(de)功(gong)能(neng)模塊(kuai)。
③Y模塊:可選(xuan)模塊(kuai),用于中通量的貼壁(bi)細胞不消化原位(wei)轉(zhuan)(zhuan)染,提供一(yi)個24孔電轉(zhuan)(zhuan)板條(每孔350μL體系)的轉(zhuan)(zhuan)染位(wei)置,可同時(shi)獨立轉(zhuan)(zhuan)染24種貼壁(bi)細胞。適用于神經元等不適于消化的貼壁(bi)細胞,并可以(yi)在細胞任(ren)意生長時(shi)期轉(zhuan)(zhuan)染,細胞活力好,大大豐富了(le)貼壁(bi)細胞轉(zhuan)(zhuan)染方式。
④LV模塊:可(ke)選(xuan)模(mo)塊,用于(yu)單一細(xi)胞(bao)大規模(mo)流式轉染(ran)(ran),單次轉染(ran)(ran)細(xi)胞(bao)數量高達1×10^7至(zhi)2×10^9,提(ti)供手動單次進樣1mL體(ti)系電轉盤(pan)、自動連(lian)續(xu)進樣20mL體(ti)系電轉盤(pan)兩種轉染(ran)(ran)方(fang)式,可(ke)共享X模(mo)塊優化后的轉染(ran)(ran)程序,直接線性放大細(xi)胞(bao)數量。其耗(hao)材全封(feng)閉無菌處(chu)理,操作(zuo)軟(ruan)件符合美國(guo)FDA 21CFR Part 11規定,可(ke)用于(yu)人T細(xi)胞(bao)以(yi)及蛋(dan)白(bai)、抗(kang)體(ti)生產(chan)等(deng),是(shi)CRISPR基因(yin)編輯、CAR-T細(xi)胞(bao)治療(liao)的理想選(xuan)擇。
⑤96孔模塊:可選(xuan)模(mo)(mo)塊(kuai),即96-Well Shuttle,是高通(tong)量摸索(suo)實驗條(tiao)件(jian)(jian),進行預實驗的擴(kuo)展(zhan)模(mo)(mo)塊(kuai)。可提(ti)供一個可拆卸的96孔(kong)轉(zhuan)染位置(zhi),同時(shi)(shi)設(she)置(zhi)96個不同轉(zhuan)染程序,5min完成條(tiao)件(jian)(jian)優化。使(shi)用時(shi)(shi),需連接C模(mo)(mo)塊(kuai)+X模(mo)(mo)塊(kuai)。
三、Lonza Nucleofector細胞核轉染試劑盒
作為(wei)Lonza Nucleofector核轉(zhuan)(zhuan)儀專用試劑(ji)盒,包含細胞特異(yi)性(xing)轉(zhuan)(zhuan)染(ran)試劑(ji)、陽性(xing)對照、電極杯/電轉(zhuan)(zhuan)板條/電轉(zhuan)(zhuan)盤(pan)耗(hao)材等。根(gen)據儀器型號、細胞類(lei)型、轉(zhuan)(zhuan)染(ran)次數的差(cha)異(yi),提供200余種(zhong)選擇,滿足各類(lei)原代(dai)細胞、細胞系的轉(zhuan)(zhuan)染(ran)需求。
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