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用于懸浮/貼壁哺(bu)乳動物真核細胞的大(da)容量(liang)核酸轉染儀
LONZA 4D-Nucleofector LV 大規模細胞核轉染系統（4D-Nucleofector LV Unit，簡稱LV模塊，或LV單元），是在傳統電穿孔技術的基礎上，針對每一種細胞，優化電脈沖參數、轉染液，使細胞轉染效率、細胞活率得到顯著提升，解決了原代細胞、干細胞、T細胞等使用傳統電穿孔轉染效率低下的問題。
4D-Nucleofector核轉技術（原德國Amaxa Nucleofection核轉染技術）對質粒DNA轉染效率高達90％，寡核苷酸（如siRNA）轉染效率高達99％，面世20年來，已成功轉染＞1200種細胞系、＞130種原代細胞，并在干細胞、免疫細胞、神經細胞等各類較難轉染的細胞中獲得了優秀的轉染效果。
同時，4D-Nucleofector核轉染可讓外源基因直接穿過核膜進入細胞核，不依賴細胞有絲，實現2小時快速表達。LONZA 4D-Nucleofector LV模塊可提供單次最高2×10^9個(ge)細胞、封閉、無菌的高效轉染，在人T細胞、CHO懸浮細胞、HEK23懸浮細胞、K562細胞等超過700種細胞中大量應用。
LONZA全球共享數據庫，包含超過1500種原代細胞、細胞系的轉染數據，提供包括細胞來源、傳代、培養條件、培養基、到轉染后培養技巧的成熟流程，讓研究者在海量數據支持中快速開展實驗，并取得成功。操作4D-Nucleofector核轉染設備時，只需一鍵調用LONZA內置的轉染程序，即可實現細胞快速、高效轉染，而無需自行摸索轉染條件。
4D-Nucleofector核轉染技術優勢
-采用高分子聚合物電極，避免傳統鋁電極的離子毒害，維持細胞生理狀態，提高存活率。
-轉染后可快速觀察實驗結果，例如轉染GFP后最快2小時可觀察到蛋白。
-無需自己優化條件，擁有超過650種細胞類型的現成程序，可直接使用，全球共享數據庫，超過1500條轉染數據可供參考。
-可轉染包括DNA、mRNA、miRNA、siRNA、肽、蛋白質在內的多種底物。
-可用于難以轉染的原代細胞、干細胞、神經元、細胞系。
-靈活的轉染規模縮放，可在低、中、高通量中輕松轉移，實現2×10^4至1×10^9個細胞數量的輕松擴展。
-已在全球8000多家同行評議的出版物中發表。
LONZA 4D-Nucleofector LV大規模細胞核轉染儀，細胞治療基礎研究高效電轉染系統
1、封閉、無菌的系統和耗材設計，滿足細胞治療基礎研究的需求。
2、20mL大容量，LV核轉儀提供單次1mL（最多1×10^8個細胞）的手動加樣、20×1mL（最多2×10^9個細胞）的自動加樣，快速高效。
3、符合cGMP要求，可使用符合美國FDA21 CFR part 11、歐盟Annex 11的軟件進行控制，適用于嚴格監管的GMP實驗室。
①用戶管理（登陸，不同級別）
②具有用戶姓名與時間標記的電子簽名
③任何記錄的修改或是數據的創建均被記錄在案
④結果報告：失敗報告，以及詳細的問題描述
⑤可根據21CFR part11的要求導出數據（加密，預防）
⑥審計追蹤（使用記錄、更改記錄）
⑦無數據刪除可能
4、規模可簡單放大，在4D-Nucleofector X模塊（4D-Nucleofector X Unit，簡稱X模塊，或X單元）上進行的2×10^4細胞數量的優化轉染方案，可直接在LV模塊上使用。
實驗數據：分別用4D-Nucleofector細(xi)胞核(he)轉(zhuan)儀X模(mo)塊(kuai)（100μL）、LV模(mo)塊(kuai)（1mL）向(xiang)包括人T細(xi)胞、PBMC、293細(xi)胞、CHO細(xi)胞在內多種代表(biao)性(xing)細(xi)胞中轉(zhuan)染pmaxGFP載(zai)體，實現轉(zhuan)染規模(mo)的線性(xing)放大。
參考文獻
1.Closed-system transposon-mediated manufacture of GMP grade CAR T-cells via the Lonza Nucleofector LV XL. LM Brownrigg,et al. ELSERIER(2020)
2.Biomimetic mineralized collagen scaffolds and their effect on osteogenic differentiation. L Luo,et al. ELSERIER(2020)
3.Optimization of clarification process for viral vectors. B Raghavan,et al. ELSERIER(2020)
4.Generation and testing of clinical-grade exosomes for pancreatic cancer. Mayela Mendt,et al. JCI Insight(2018)
5.Off the shelf T cell therapies for hematologic malignancies. BJ McCreedy,et al. ELSERIER(2018)
6.Unlocking the Potential of CRISPR-Based Gene Editing. Andrea Toell. Genetic Engineering & Biotechnology News(2017)
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